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Criopreservação de Embriões

Atualizado: 26 de Ago de 2019

Criopreservação compreende o resfriamento e armazenamento de células em temperaturas muito baixas de modo a interromper todos os processos metabólicos. Na prática as células são congeladas e mantidas à temperatura de -196 0C, em Nitrogênio líquido.


A Vitrificação e o Congelamento Lento são duas técnicas básicas de criopreservação de embriões.

Na primeira, a taxa de resfriamento é muito rápida - da ordem de dezenas graus Celsius por segundo- combinada com altas concentrações de crioprotetores, geralmente glicerol, DMSO ou etilenoglicol. Os crioprotetores promovem a desidratação dos compartimentos intracelulares para que depois ocorra o congelamento. Deste modo, evita-se a formação de cristais de gelo no interior das células que causam lesões nas membranas, reduzindo a viabilidade embrionária. Este método tem as vantagens de ser rápido e não requer equipamentos para controlar a taxa de resfriamento.


 No Congelamento Lento, baixas concentrações de crioprotetores são adicionados ao meio de cultura.  Um pequeno volume deste meio contendo o embrião é inserido na palheta, resfriado até -6 0C (±1) e mantido durante alguns minutos para estabilização. Logo após é feito o “seeding” que consiste em uma indução para iniciar o congelamento. Em seguida tem início a curva gradual de resfriamento controlado, cuja taxa pode variar entre 0,3 a 0,5 graus Celsius por minuto, até alcançar a temperatura final, que pode estar entre -30 e -65 0C.  Se o resfriamento for corretamente controlado, ocorrerá a desidratação gradual e completa da matriz intracelular e não haverá significativa formação de cristais de gelo no interior das células.


Atingida a temperatura desejada as palhetas são imersas em Nitrogênio.

O sucesso da criopreservação pelo método do Congelamento Lento requer equipamentos precisos para gerenciar a taxa de resfriamento de forma adequada.


Fonte: Saragusty, J. &  Arav, A. Current Progress in Oocyte and Embryo Cryopreservation by Slow Freezing and Vitrification. Reproduction, 141: 1-19. 2011.



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